（實(shí)驗(yàn)服務(wù)）實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種在PCR反應(yīng)過程中實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光信號，對DNA模板進(jìn)行精確定量的技術(shù)。其核心原理在于：隨著循環(huán)進(jìn)行，PCR產(chǎn)物的指數(shù)增長會對應(yīng)熒光強(qiáng)度的增加。通過監(jiān)測達(dá)到設(shè)定熒光閾值所需的循環(huán)數(shù)（Ct值），即可對起始模板量進(jìn)行定量。常用的方法有SYBR Green法（嵌入雙鏈DNA發(fā)出熒光）和TaqMan探針法（序列特異性水解發(fā)光）。該實(shí)驗(yàn)流程主要包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄為cDNA，然后進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增與檢測。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可實(shí)現(xiàn)絕對定量，或通過內(nèi)參基因進(jìn)行相對定量。

（實(shí)驗(yàn)服務(wù)）實(shí)時(shí)熒光定量PCR具有高靈敏度、高特異性和寬動(dòng)態(tài)范圍的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、病原體檢測、轉(zhuǎn)基因鑒定等生命科學(xué)領(lǐng)域。