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外周血單核細胞(PBMC)是免疫學研究的關鍵材料,主要包括淋巴細胞和單核細胞。其分離通常采用密度梯度離心法。具體步驟如下:采集外周血并用抗凝劑處理。將血液用磷酸緩沖鹽水適當稀釋后,小心加在分離液(如Ficoll)液面上。進行離心,利用不同血細胞密度差異實現分層:紅細胞和多形核粒細胞密度最大沉于管底;PBMC密度較低,集中于分離液與血漿之間的界面,形成灰白色的“白膜層"。仔細吸取該層的PBMC,經過洗滌重懸,即可獲得純度較高的細胞懸液。此法分離的PBMC可用于流式細胞術、細胞培養、免疫功能分析等多種下游實驗,是免疫學、腫瘤學等領域的核心技術之一。

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